商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | SK-N-BE(2)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞細(xì)胞系 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
貨號 | E-XB6132 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 半貼半懸 | 細(xì)胞形態(tài) | 神經(jīng)母細(xì)胞樣 |
商品詳情：
別稱 SK-N-BE2; SKNBE(2); SKNBE-2; SKNBE2; SK-N-BE; SKNBE
種屬 人類
年齡（性別） 男性，2歲
組織來源 腦；神經(jīng)母細(xì)胞瘤，骨髓轉(zhuǎn)移灶
生長特性 半貼半懸
細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)母細(xì)胞樣
背景描述 SK-N-BE(2)神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞株是于1972年11月從一位多次化療及放療的擴散性神經(jīng)母細(xì)胞瘤患兒骨髓穿刺物中建立的；SK-N-BE(2)細(xì)胞顯示中等水平的多巴胺-β-羥基酶活性。有報道稱，SK-N-BE(2)細(xì)胞的飽和濃度超過1×10^6細(xì)胞/cm^2。SK-N-BE(2)細(xì)胞形態(tài)多樣，有的有長突觸、有的呈上皮細(xì)胞樣；SK-N-BE(2)細(xì)胞會聚集，形成團塊并浮起。
生物安全等級 1
生長培養(yǎng)基 MEM/F12＋10% FBS＋1% P/S
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時間 ~36-48小時
凍存條件
凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
致瘤性 Yes, an inoculum of 1×10^7 cells produced tumors in cortisonized hamster cheek pouches with 18% frequency.
保藏機構(gòu) ATCC; CRL-2271 DSMZ; ACC-632 ECACC; 95011815
細(xì)胞系培養(yǎng)步驟：
細(xì)胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細(xì)胞復(fù)蘇、細(xì)胞傳代和細(xì)胞凍存。
細(xì)胞復(fù)蘇?：
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。
將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37℃預(yù)熱的DMEM培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代?：
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DME培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
?細(xì)胞凍存?：
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
這些步驟確保了細(xì)胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴展，為科學(xué)研究提供了大量的細(xì)胞樣本?。
?細(xì)胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細(xì)胞復(fù)蘇、細(xì)胞傳代和細(xì)胞凍存。
細(xì)胞復(fù)蘇?：
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。
將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37℃預(yù)熱的DMEM培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代?：
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞凍存?：
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
這些步驟確保了細(xì)胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴展，為科學(xué)研究提供了大量的細(xì)胞樣本?
細(xì)胞接收后的處理：
1）SK-N-BE(2)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞細(xì)胞系收到細(xì)胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1） 準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
公司正在出售的產(chǎn)品：
雞前脂肪細(xì)胞 | 人結(jié)腸上皮細(xì)胞 |
兔腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 人甲狀腺上皮細(xì)胞 |
兔外周血單個核細(xì)胞 | 人卵巢間質(zhì)細(xì)胞 |
人胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞 | 人附睪成纖維細(xì)胞 |
人胃黏膜上皮細(xì)胞 | 人脂肪微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
小鼠腸巨噬細(xì)胞 | 人成骨細(xì)胞 |
大鼠腸巨噬細(xì)胞 | 人T淋ba細(xì)胞 |
兔胰腺星狀細(xì)胞 | 人淋ba結(jié)成纖維細(xì)胞 |
人直腸平滑肌細(xì)胞 | 人喉黏膜上皮細(xì)胞 |
小鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞 | 人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
大鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞 | 大鼠肺成纖維細(xì)胞 |
兔外周血白細(xì)胞 | 大鼠主動脈弓平滑肌細(xì)胞 |
人胎盤羊膜細(xì)胞 | 大鼠結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞 |
小鼠卵巢顆粒細(xì)胞 | 大鼠腸道干細(xì)胞細(xì)胞 |
大鼠卵巢顆粒細(xì)胞 | 大鼠腎近端小管上皮細(xì)胞 |
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