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產(chǎn)品展示   ProductsATCC細(xì)胞>>轉(zhuǎn)化細(xì)胞>>胚胎干細(xì)胞;Endeavour-1
 
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產(chǎn)品名稱:
胚胎干細(xì)胞;Endeavour-1
產(chǎn)品型號:
產(chǎn)品報(bào)價(jià):
產(chǎn)品特點(diǎn):
胚胎干細(xì)胞;Endeavour-1相關(guān)產(chǎn)品:OP9小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞
VCaP人前列腺癌細(xì)胞
TT人甲狀腺導(dǎo)管癌細(xì)胞
RTE大鼠氣管上皮細(xì)胞
  胚胎干細(xì)胞;Endeavour-1的詳細(xì)資料:

公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:

產(chǎn)品名稱

生長特性

貨號

胚胎干細(xì)胞;Endeavour-1

貼壁生長

EY-X63704

細(xì)胞名稱  胚胎干細(xì)胞;Endeavour-1
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次

傳代情況: C5

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 陰性
?
冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Humantenmine

CAS No.:82354-38-9

中文名:胡蔓藤甲

分子式:C19H22N2O3

訂購|咨詢  凋亡相關(guān)因子(FAS) 規(guī)格: 100mg

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四氫 訂購|咨詢  凋亡相關(guān)因子(FAS) 規(guī)格: 1ml

自然銅(醋煅) 訂購|咨詢  凋亡相關(guān)因子(FAS) 規(guī)格: 1g

木棉花 訂購|咨詢  凋亡相關(guān)因子配體(FASL) 規(guī)格: 2g

枳殼(橙) 訂購|咨詢  凋亡相關(guān)因子配體(FASL) 規(guī)格: 1g

黃連(三角葉黃連) 訂購|咨詢  凋亡相關(guān)因子配體(FASL) 規(guī)格: 0.5g

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寶藿苷Ⅰ 訂購|咨詢  凋亡相關(guān)因子配體(FASL) 規(guī)格: 約20mg/支

2,6二基4(2基基)3 訂購|咨詢  凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I(ASK1) 規(guī)格: 50mg

紫河車 訂購|咨詢  凋亡誘導(dǎo)因子(AIF) 規(guī)格: 1g

鄰二二酯 訂購|咨詢  凋亡誘導(dǎo)因子(AIF) 規(guī)格: 1ml

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訂購|咨詢  凋亡蛋白酶激活因子1(APAF1) 規(guī)格: 100mg

火仁 訂購|咨詢  凋亡蛋白酶激活因子1(APAF1) 規(guī)格: 1g

路邊青 訂購|咨詢  凋亡蛋白酶激活因子1(APAF1) 規(guī)格: 4g

蓮心鹼高 訂購|咨詢  旁血小板溶蛋白(PPL) 規(guī)格: 20mg

加蘭他敏 訂購|咨詢  旁血小板溶蛋白(PPL) 規(guī)格: 100mg

ERRalpha  雌激素受體相關(guān)蛋白α抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Moclobemide

DCHS1  鈣粘蛋白19抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Astragaloside IV

AXL/UFO  粘附相關(guān)激酶抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Astragaloside IV

Delta Catenin  δ連環(huán)蛋白/δ連環(huán)素/δ鏈接素抗體(δcatenin)    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Nateglinide

OCIAD1  卵巢癌免疫反應(yīng)抗原抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Nateglinide

PAGE4/GAGE9  前列腺癌相關(guān)蛋白4抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Nateglinide

PMPCB  線粒體導(dǎo)肽水解酶β抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml "()scopolamine Nbutyl bromide "

PRAME  黑色素瘤優(yōu)先表達(dá)抗原抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Tannic acid

唾液  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:NAN  含量:BR,98%

萬古  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:VancomycinHC1  含量:4100~66000,藍(lán)色液體,預(yù)染,9條帶

王樹脂  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:Wangresin  含量:BR

斯塔  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:RibostamycinSulfatesalt  含量:BR,<62.5μg/ml

微晶蠟  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:Ceresin  含量:BR,85%

維多利亞藍(lán)B  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:BasicBlue26  含量:ACS

維生素A十六酯  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:VitaminApalmitate  含量:IND

維生素B4  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:VB4  含量:USP級,83%,800u/mg

維生素C酶  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:ASO  含量:BR,300U/mg

維生素E醋酯  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:VitaminEacetate  含量:高純,67%
胚胎干細(xì)胞;Endeavour-1LB肉湯顆粒規(guī)格:250g用途:用于分子生物中大腸桿菌的培養(yǎng)

檢定培養(yǎng)基規(guī)格:BR250g詳情介紹

PBS緩沖液(PH7.4)規(guī)格:250g用途:用于檢測李斯特氏菌時(shí)樣品的制備

1%TTC溶液規(guī)格:5支/盒用途:每支添加于100mlHB0268中

細(xì)菌總數(shù)顯色培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于快速、準(zhǔn)確檢測菌落總數(shù),培養(yǎng)24小時(shí),細(xì)菌顯紅色

腸球菌肉湯規(guī)格:250g用途:用于腸球菌增菌培養(yǎng)
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 胚胎干細(xì)胞 Endeavour-1
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021-69985169
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